Correo IF
Directorio
Responsable: Dr. Roberto Sánchez Olea
Lineas de Investigación
a) Determinar la función de las GTPasas Gpn1 y Gpn3 en células de mamífero en cultivo a través de analizar las consecuencias de suprimir su expresión con técnicas de RNA de interferencia (Sanchez-Olea et al., 2008; JBC 283:24400)
b) Identificar los mecanismos moleculares regulados por Gpn3 que expliquen nuestros hallazgos originales de que Gpn3 es esencial para la acumulación nuclear de la RNA polimerasa II (Calera et al., 2011; BBA 1813:1708).
c) Explorar diferencias en la importancia de Gpn3 en la acumulación nuclear de la RNA polimerasa II entre células tumorogénicas y no tumorogénicas de mama (Calera et al., 2011; BBA 1813:1708), y su empleo en el diagnóstico del cáncer.
d) Investigar la localización y tráfico intracelular de las proteínas Gpn1 y Gpn3 utilizando versiones híbridas con proteínas fluorescentes. Utilizamos DNA recombinante para generar mutantes puntuales y otras variantes moleculares de Gpn1 y Gpn3, y analizamos el efecto de estos cambios en su localización y tráfico intracelular con microscopía de fluorescencia
e) Análisis de las modificaciones postraduccionales de la proteína Gpn1 durante el ciclo celular y en respuesta a la exposición a la luz ultravioleta
f) Caracterizar la interacción física entre las proteínas Gpn1 y Gpn3 tanto en células de mamífero en cultivo, como con proteínas Gpn1 y Gpn3 recombinantes producidas en bacterias. Empleamos ensayos de inmunoprecipitación y western blot, así como la técnica de FRET
g) Determinar la estructura tridimensional de las proteínas Gpn1 y Gpn3 recombinantes producidas en bacterias por cristalografía de rayos X. Aplicamos técnicas de DNA recombinante para generar las construcciones moleculares que nos premitan purificar HisGpn1 y HisGpn3 producidas en bacterias en cantidad y pureza suficiente para su cristalización.
Publicaciones
Rogelio González-González, José A. Guerra-Moreno, Gema R. Cristóbal-Mondragón, Violeta Romero, Sonia G. Peña-Gómez, Gabriela M. Montero-Morán, Samuel Lara-González, Andrés Hernández-Arana, Daniel A.Fernández-Velasco, Mónica R. Calera, Roberto Sánchez-Olea (2017). Human Gpn1 purified from bacteria binds guanine nucleotides and hydrolyzes GTP as a protein dimer stabilized by its C-terminal tail. Protein Expression and Purification 132:85-96
Gehenna Guerrero-Serrano, Leonardo Castanedo, Gema R. Cristóbal-Mondragón, Javier Montalvo-Arredondo, Lina Riego-Ruíz, Alexander DeLuna, Alejandro De Las Peñas, Irene Castaño, Mónica R. Calera, Roberto Sánchez-Olea (2017). Biochimica et Biophysica Acta - Molecular Cell Research 1864(3):451-462
Lucía E. Méndez-Hernández, Ana E. Pérez-Mejía, Bárbara Lara-Chacón, Angel A. Barbosa-Camacho, Sonia G. Peña-Gómez, Mayra Martínez-Sánchez, Angélica Y. Robledo-Rivera, Roberto Sánchez-Olea, Mónica R. Calera (2014). Gpn1 and Gpn3 associate tightly and their protein levels are mutually dependent in mammalian cells. FEBS Letters 588 (21):3823-3829
Humberto Reyes-Pardo, Angel A. Barbosa-Camacho, Ana E. Pérez-Mejía, Bárbara Lara-Chacón, Leslie A. Salas-Estrada, Angélica Y. Robledo-Rivera, Gabriela M. Montero-Morán, Samuel Lara-González, Mónica R. Calera, Roberto Sánchez-Olea (2012) A nuclear export sequence in GPN-loop GTPase 1, an essential protein for nuclear tageting of RNA polymerase II, is necessary and sufficient for nuclear export. Biochimica et Biophysica Acta –Molecular Cell Research 1823(10):1756-1766
Mónica R. Calera, Cristina Zamora-Ramos, Minerva G. Araiza-Villanueva, Carlos A. Moreno-Aguilar, Sonia G. Peña-Gómez, Fabiola Castellanos-Terán, Angélica Y. Robledo-Rivera, Roberto Sánchez-Olea (2011). Parcs/Gpn3 is required for the nuclear accumulation of RNA polymerase II. Biochimica et Biophysica Acta - Molecular Cell Research 1813(10):1708-1716.
Calera, M.R., Wang, Z., Sánchez-Olea, R., Paul, D.L., Civan, M.M., y Goodenough, D.A. (2009). Depression of intraocular pressure following inactivation of connexin43 in the nonpigmented epithelium of the ciliary body. Invest Ophthalmol Vis Sci. 50(5):2185-2193.
Sánchez-Olea, R., Calera, M.R., Degterev, A. (2009). Molecular pathways involved in cell death after chemically induced DNA damage. Molecular, Clinical and Environmental Toxicology 1: 209-229.
Franco, R., Sánchez-Olea, R., Reyes-Reyes, E.M., Panayiotidis, M.I. (2009). Environmental toxicity, oxidative stress and apoptosis: Ménage a trios. Mutation Resarch/Genetics Toxicology and Environmental Mutagenesis 674: 3-22